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第一代Sanger测序平台




        一代Sanger测序是基于Frederick Sanger发明的双脱氧末端终止法对核酸序列进行检测的技术。自从1986年第一台基因分析仪问世以来,Sanger测序经历了多次技术革新。

        多通道荧光标记的毛细管电泳测序技术已经得到了普及,其原理是:将分别标记四种荧光的四种ddNTP掺入dNTPs中进行PCR扩增,由于PCR产物的每一个位置都有ddNTP的随机掺入,而脱氧核糖上缺乏链延伸的3’端羟基,导致DNA链则在该位置终止延伸,因此经过扩增后得到了一组长度相差一个碱基的成百上千的片段,将得到的不同大小的片段进行毛细管电泳,通过对荧光的检测,最终获得目的片段的序列。

 

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图1.测序PCR产物的毛细管电泳示意图

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图2. sanger测序的结果

        Sanger测序能够直接获取核酸的序列信息,也是目前获取核酸序列信息的金标准。在分子生物学研究中,对质粒、扩增子等片段的de novo测序与重测序等是很多研究工作的基础。在临床医学方面,Sanger测序广泛应用于病原体检测、药物基因组学检测、肿瘤基因检测等分子诊断领域。

       目前,我们引进了美国Applied Systems的3500 DX(8通道)和3130(4通道)、3130xl(16通道)测序平台。我们正在利用以上测序平台,开展药物基因组学、肿瘤基因检测等多项临床分子诊断试剂的研发,并且将逐步扩大到基础研发、临床科研服务等方面,为完善公司全平台技术能力打下重要基础。

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                    ABI3500DX                                                      ABI3130                                                     ABI3130XL